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山东省卫生厅关于印发《甲型H1N1流感病毒实验活动管理工作规范》的通知

  9、在风险评估和确保 HEPA 功能正常的基础上,生物安全柜的排风可以在室内循环;但实验室应具备通风换气的条件。
  10、有可靠的电力供应和应急照明。
  (二)核酸检测操作
  1、除满足四(一) 所要求的条件外,从事甲型H1N1流感RT-PCR核酸检测应具有四个独立物理分区,分别为试剂准备区、标本制备区、扩增区和产物分析区,每个区均具有独立的缓冲间,并保证风向从外到内的定向气流。
  2、从事Real-Time RT-PCR核酸检测应具有三个独立物理分区,分别为试剂准备区、标本制备区和扩增、产物分析区,每个区均具有独立的缓冲间,并保证风向从缓冲间往试验区定向气流。
  (三) 甲型H1N1流感病毒分离培养的操作
  甲型H1N1流感病毒分离培养的操作除满足四(一) 所要求的条件外,实验室应有可控的通风系统,确保实验室由外向内的定向气流。实验室排风不可再循环至建筑物其他区域。当实验室内的气体要排放到室外时,必须能快速从排气管道及所在建筑物派出,气体可通过HEPA过滤排放。
  (四) 实验室生物安全
  1、工作人员应穿戴个人防护设备,包括一次性手套、反穿衣、隔离衣、连体衣、帽子、鞋套或专用鞋子,眼部保护装备。其中工作人员须佩戴生物防护型N95(1860)口罩,应经过培训且每个人须通过密合度测试。
  2、对标本进行核酸检测时,标本接收分装、核酸操作、PCR反应体系配制、电泳操作应当在不同房间进行。不同房间的移液器和枪头不应混用,标本分装和PCR反应体系配制的区域不应接触到核酸,并有单独的实验防护用品。
  3、所有感染性或潜在感染性材料的操作应在年检合格的生物安全柜中进行。
  4、应使用带有密封离心杯或转子的离心机,并且在生物安全柜中打开离心杯或转子。
  五、甲型H1N1流感实验室仪器设备配置
  1、核酸检测
  甲型H1N1流感实验室须配置以下仪器才能开展甲型H1N1流感核酸检测工作:Ⅱ级生物安全柜、PCR仪、Real-time PCR仪、台式高速低温离心机、凝胶成像仪、混匀器、高压锅、电泳仪及-30℃冰箱各一台,同时需配置不同刻度的100~1000?l、20~200?l和2~20?l移液器各二。如果只进行Real-time PCR检测,可不需要PCR仪、凝胶成像仪、电泳仪。
  2、病毒培养
  甲型H1N1流感实验室须配置以下仪器才能开展甲型H1N1流感病毒分离工作:Ⅱ级生物安全柜、CO2培养箱、-70℃冰箱、离心机(高速)、倒置显微镜、高压锅和普通冰箱各一台,同时需配置不同刻度的100~1000?l、20~200?l和2~20?l移液器各两个。


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