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中华人民共和国国家标准职业性苯中毒诊断标准及处理原则

  d.如红细胞不完全溶解,影响血小板计数的准确性时,可加大稀释倍数,或另换稀释液。
  e.如室温较高时,可将滴好的计数池放在培养皿下,中间放一湿棉球,以防计数池中的稀释液干掉。
 附 录 C 中性粒细胞碱性磷酸酶活性定量测定法(补充件)
  C.1 原理
  中性粒细胞中的碱性磷酸酶(简称碱酶)在一定条件下能使β-甘油磷酸钠水解释出无机磷, 后者与钼酸试剂结合成磷钼酸复合物, 再以氨基萘酚磺酸还原为钼蓝而呈现蓝色,用光电比色法求得所释放的无机磷含量,表示酶的活性。
  C.2 试剂
  a.葡聚糖:分子量20万,用生理盐水配制成2%溶液,在冰箱中可保存一个月。
  b.β-甘油磷酸钠溶液(0.026M):称取β-甘油磷酸钠溶于碳酸—重碳酸盐缓冲溶液,将pH调至9.9,液面盖一层石油醚,在冰箱内保存。
  c.碳酸-重碳酸盐缓冲液:
  A液 称取无水碳酸钠2.12g,溶于重蒸馏水100ml,配成0.2M无水碳酸钠溶液。
  B液 称取碳酸氢钠1.68g,溶于重蒸馏水100ml,配成0.2M碳酸氢钠溶液。
  取A液100ml与B液100ml混合,加重蒸馏水600ml,pH为9.9。
  d.皂素:用生理盐水配成2%溶液。
  e.氯化镁溶液(0.05M):用重蒸馏水配成。
  f.三氯乙酸溶液:用重蒸馏水配成50%及5%二种浓度。
  g.钼酸铵溶液:称取钼酸铵12.50g,溶于重蒸馏水100ml,加10M硫酸150ml,再加重蒸馏水到500ml。
  h.0.25%氨基萘酚磺酸溶液:称取氨基萘酚磺酸0.0625g、亚硫酸氢钠1.33g、亚硫酸钠0.25g,于研钵中磨成细粉,加重蒸馏水到25ml,过滤后保存于冰箱内。用时稀释一倍。
  i.标准磷储备液(每毫升含无机磷1mg): 称取干燥恒重的分析纯磷酸二氢钾2.1971g置于容量瓶中,加重蒸馏水至500ml,加氯仿2滴,在冰箱内保存。
  j.肝素:用生理盐水配成1%溶液。
  C.3实验方法
  C.3.1 白细胞分离
  自耳垂或手指取血0.15ml,置于预先准备好的含1滴肝素和0.30ml葡聚糖溶液的微量试管中,用手振摇混匀,静置10分钟。待红细胞沉降界面清晰时,小心吸出上层悬浮液,置于小离心管中,加入2倍生理盐水,摇匀后离心(2500转/分钟)8分钟。取出上清液弃去,保留沉淀。再向有沉淀的离心管加生理盐水2ml,混匀,再离心8分钟。重复2次,弃去上清液,管中留下液体约0.15ml,与沉淀混匀,即为白细胞悬浮液, 作白细胞计数2~4次,取其


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